Thèse Pneumo-3G Thérapie Photodynamique de Troisième Génération Ciblant la Neuropiline-1 dans le Mésothéliome Pleural H/F - Doctorat_Gouv

Établissement : Université de Lille
École doctorale : Biologie Santé de Lille
Laboratoire de recherche : Centre de Recherches en Cancérologie de Lille
Direction de la thèse : Olivier MORALES ORCID 0000000221353265
Début de la thèse : 2026-10-01
Date limite de candidature : 2026-04-28T23:59:59

Le mésothéliome pleural (MP) est une tumeur rare, agressive et au pronostic sombre, en raison de son hétérogénéité biologique et de l'absence de cibles thérapeutiques spécifiques. La neuropiline-1 (NRP-1), fortement surexprimée dans le MP et impliquée dans l'angiogenèse, l'invasion tumorale et l'immunosuppression, représente une cible prometteuse. La thérapie photodynamique (PDT), fondée sur l'activation lumineuse d'un photosensibilisateur (PS) générant des ROS, induit une mort cellulaire contrôlée pouvant devenir immunogène. Les essais cliniques d'OncoThAI ont montré la faisabilité de la PDT intrapleurale, mais avec des PS non ciblés.
Ce projet doctoral vise à établir la preuve de concept d'une PDT ciblée grâce à un PS de troisième génération dirigé contre NRP-1. L'objectif est de démontrer à la fois une destruction sélective des cellules de MP et l'activation d'une réponse immunitaire antitumorale durable.
Le travail s'articule en quatre axes :
1.Ciblage tumoral : caractérisation de l'expression de NRP-1 dans plusieurs lignées de MP, validation du ciblage spécifique du PS et analyse histologique sur tissus de patients, incluant les liens avec le microenvironnement immunitaire.
2.Efficacité photodynamique : mesure de la cytotoxicité, des ROS, des voies de mort impliquées et du profil de sécurité.
3.Potentiel immunomodulateur : capacité des cellules traitées à activer les cellules immunitaires humaines.
4.Évaluation in vivo dans un modèle murin humanisé portant un MP humain pour tester l'effet antitumoral et la réponse immunitaire déclenchée.
Ces résultats consolideront la valeur thérapeutique du ciblage NRP-1 en PDT et prépareront le développement de futurs essais cliniques.

Le mésothéliome pleural (MP) est une tumeur rare mais agressive, principalement liée à l'exposition à l'amiante. Cette pathologie présente un pronostic défavorable avec une survie médiane de six à douze mois et un taux de survie à cinq ans inférieur à 10 %. Les traitements actuels, incluant la chimiothérapie, les thérapies anti-angiogéniques et les immunothérapies, restent insuffisants, en particulier pour les sous-types non épithélioïdes, en raison de l'hétérogénéité tumorale et des mécanismes de résistance. L'identification de nouvelles cibles moléculaires et le développement de stratégies thérapeutiques multimodales constituent donc un enjeu majeur.
La neuropiline-1 (NRP-1) est un corécepteur multifonctionnel surexprimé dans le MP, impliqué dans la prolifération, l'invasion, l'angiogenèse et la modulation du microenvironnement immunitaire. Sa surexpression est corrélée à une progression tumorale rapide et à une survie réduite, faisant de NRP-1 une cible particulièrement pertinente pour de nouvelles approches thérapeutiques. La thérapie photodynamique (PDT) permet de tirer parti de cette cible en détruisant sélectivement les cellules tumorales via l'activation d'un photosensibilisateur par la lumière et l'oxygène, générant des espèces réactives capables d'induire plusieurs formes de mort cellulaire. La PDT possède en outre un effet immunostimulant, induisant une mort cellulaire immunogène qui active les lymphocytes T et module le microenvironnement tumoral. Les travaux récents de notre laboratoire (Baydoun et al., Quilbé et al., Boidin et al., Trioen et al.) ont ainsi montré que la PDT peut déclencher une réponse immunitaire antitumorale spécifique, validant son potentiel en combinaison avec l'immunothérapie.
Par ailleurs, notre équipe a démontré la faisabilité et la sécurité de la PDT intrapleurale dans le cadre des essais cliniques Méso-PDT et IMPALA, associée à une immunothérapie anti-PD1, avec un bénéfice clinique notable et une survie prolongée. Cette expertise inclut le développement de dispositifs d'illumination intrapleurale, le contrôle précis de la dosimétrie et le suivi immunologique des patients. En partenariat avec le LRGP (CNRS / Université de Lorraine, Nancy), nous avons développé un photosensibilisateur de troisième génération ciblant spécifiquement NRP-1, récemment déposé avec une preuve de concept dans le cancer du poumon non à petites cellules. Ce photosensibilisateur combine un ciblage moléculaire précis des cellules tumorales, une phototoxicité accrue et la capacité d'induire une réponse immunitaire antitumorale, réunissant trois axes thérapeutiques dans une seule approche : destruction directe des cellules NRP-1, inhibition des voies de signalisation angiogéniques et stimulation du système immunitaire. Son importance et son efficacité dans le contexte du MP, sont le coeur du sujet proposé.
La convergence de la connaissance des mécanismes moléculaires du MP, de l'expertise clinique et préclinique de l'équipe en PDT et de l'innovation pharmaceutique du photosensibilisateur de troisième génération permet de proposer une approche multimodale originale. Cette stratégie offre la possibilité de cibler spécifiquement les cellules tumorales, d'induire leur destruction et de restaurer une réponse immunitaire antitumorale efficace, répondant ainsi aux limites des traitements actuels. Elle constituera une avancée majeure dans la prise en charge du MP et ouvre la voie à des applications potentielles dans d'autres cancers exprimant NRP-1.

L'objectif principal de ce projet est d'évaluer l'efficacité d'un photosensibilisateur de troisième génération ciblant la neuropiline-1 dans le traitement du mésothéliome pleural par thérapie photodynamique. Cette approche vise à améliorer la sensibilité des cellules tumorales à la PDT et à renforcer l'immunité antitumorale afin d'augmenter la survie des patients. En validant cette stratégie, nous espérons établir une base solide pour de futurs essais cliniques, contribuant ainsi à une meilleure prise en charge du MP et à l'innovation dans le domaine des thérapies anticancéreuses.

Pour répondre au sujet, nous anticipons un programme de recherche divisé en 4 parties (Work Packages, WP), successives et interdépendantes:

WP1 - Ciblage NRP1
Analyse de l'expression de NRP1 dans des lignées de mésothéliome pleural (RT-qPCR, Western blot, cytométrie) pour identifier le meilleur modèle. Vérification du ciblage du photosensibilisateur (PS) par fluorescence et microscopie confocale. Validation sur tissus de patients (histologie, immunomarquages, corrélations cliniques, protéomique spatiale).

WP2 - Efficacité de la PDT
Optimisation des conditions de thérapie photodynamique (doses de PS, incubation, illumination à 672 nm). Évaluation de la viabilité (CellTiter-Glo), de la toxicité hors illumination (LDH), de la production de ROS (DCFDA), et du type de mort cellulaire (Annexin V/PI, caspase-3, PARP).

WP3 - Immunognénicité et Réponse immunitaire ex vivo
Production de milieux conditionnés post-PDT et dosage des DAMPS et de l'induction de la maturation des cellules dendritiques.
Production de milieux conditionnés post-PDT et stimulation de PBMCs humains. Analyses : prolifération (³H-thymidine), sécrétome (ELISA multiplex), immunophénotypage (activation T CD4+/CD8+). Dosage des signaux immunomodulateurs libérés.

WP4 - Modèle in vivo humanisé
Développement d'un modèle SCID humanisé (PBMCs + cellules MP bioluminescentes). Suivi tumoral longitudinal (imagerie). Analyse des réponses immunitaires systémiques et de l'infiltration tumorale (cytométrie, histologie, RNA-seq). Évaluation éventuelle d'une combinaison avec anti-PD1.

Etudiant très motivé par la recherche translationnelle ayant validé un Master 2 Recherche ou équivalent.
Connaissances théoriques de base :
- immunologie fondamentale
- cancérologie fondamentale
- Immunologie des cancers
- Immunothérapie des cancers
- Thérapies innovantes
Compétences personnelles:
- Esprit de synthèse de données bibliographiques
- Capacité d'analyse et d'interprétation scientifique
- Capacité de mise en place de plans expérimentaux
- Maitrise de l'anglais scientifique (écrit/orale)
- Esprit d'équipe et de collaboration
Compétences scientifiques :
- culture cellulaires: lignées tumorales
- isolement et culture de cellules immunitaires primaires
- Etudes phénotypiques par Cytométrie en Flux (mise en place et analyse)
- Techniques de biologies cellulaires: test prolifération, viabilité, MLR, Mort cellulaire
- Techniques Biochimiques et Biologie Moléculaires : ELISA, WB, RT-Q-PCR
- Experimentation animale (un diplome acquis serait un plus)